体外诊断试剂干扰因素及其消除方法

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[生物与医学]

体外诊断试剂干扰因素及其消除方法

 楼主| longmen 发表于 2020-4-30 10:16  
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本帖最后由 longmen 于 2020-4-30 10:18 编辑

1、非特异性干扰
1)疏水作用
原理:反应环境中存在的疏水性的物质,如样本中的脂肪/细菌/细胞碎片与Ag/Ab 或胶乳通过疏水作用结合,产生假阳。
处理方式:表面活性剂或亲水聚合物分解。
2)补体
补体(complement,C)是存在于正常人和动物血清与组织液中的一组活化后具有酶活性的蛋白质。
原理:抗体在标记过程中,Ab 的Fc 段与C1q 补体结合位点暴露,激活血清中的补体分子与包被或标记Ab 结合,产生假阳。
处理方式:通过EDTA(络合剂)处理样本。
3)类风湿因子
类风湿因子(rheumatoid factor,RF)是针对IgG Fc 片段上抗原表位的一类自抗体,一般为IgG 和IgM。
原理:人血清中的类风湿因子(RF)与包被或标记Ab 的Fc 片段结合产生假阳。
处理方式:使用无Fc 片段的Fab 片段抗体动物IgG 中和。

2、异噬性抗体
异嗜性抗体是指能够结合动物抗体而干扰免疫分析的所有人源抗体。
包括:①人抗鼠抗体(Human Anti-More Antibodles HAMA)
②人抗山羊抗体(HAGA)
③人抗兔抗体(HARA)
异嗜性抗体从何而来?
a 动物接触(驯兽师、兽医)
b 动物产品接触(烹饪)
c 动物辅助治疗(胸腺细胞、羊细胞、胚胎细胞)
d 食物(奶酪)
e 注射疫苗
f 输血
g 自身免疫性疾病
h 母婴传递
I 心脏病变秘方药物
异嗜性抗体干扰的原理

3、什么是阻断剂
阻断剂是一种可结合异嗜性抗体,从而有效防止异嗜性抗体介导的免疫分析干扰的生物制剂。
1)阻断剂类型
a 被动阻断剂:非特异性物质(鼠IgG 等),结合异嗜性抗体的亲和力弱。
b 主动阻断剂:能特异性结合人类异嗜性抗体,结合异嗜性抗体的亲和力强。
2)常见的阻断剂见附件
4、怎样确认干扰
1)同一样本采用不同检测方法,若结果不一致说明可能存在干扰物。
2)将样本倍数稀释后再检测,若检测值呈非线性,说明存在干扰物。
3)同一样本添加阻断剂与为添加阻断剂的检测结果不一致,说明存在干扰物。
4)同一样本56℃灭活半小时与不灭活检测结果不一致,说明可能存在补体干
扰。



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 楼主| longmen 发表于 2020-5-25 11:42   显示全部楼层
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