求助怎么鉴别提取的细胞是否为淋巴细胞

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[分子生物]

求助怎么鉴别提取的细胞是否为淋巴细胞

1038415724 发表于 2017-7-10 17:04  
查看: 175358|回复: 5|显示全部楼层 |阅读模式
本帖最后由 一只虫子 于 2017-7-11 13:33 编辑

各位大侠,本人昨天从大鼠脾脏提取了细胞,我需要的是脾脏淋巴细胞,但是我不知道怎么鉴别我提出出来的细胞是否是淋巴细胞,请各位大侠不吝赐教。谢谢。
我的提取步骤如下:1.颈椎脱臼处死小鼠,用75%乙醇浸泡小鼠5min,沿腹腔中线剪开小鼠腹腔,取出脾脏置于培养皿中,
                2、剪去脂肪和筋膜组织,用Hanks液漂洗。放入盛有冷的Hanks510ml 的平皿中的200目筛网中,用注射器芯轻轻挤压, 使单个细胞经网进入溶液中。
                3、将得到的细胞悬液置于离心管中,1500r/min离心10min。弃上层清液,加入2ml红细胞裂解液裂解红细胞,轻弹,室温静置15min,(若室温过低,37℃水浴)以除去红细胞,见离心后所得为白色沉淀上方只有一层红色膜为最佳状态,
                4、用RPMI-1640培养液1000r/min离心10 min洗涤细胞3次,以除去剩余的氯化铵。将上述收集到的脾细胞置于培养瓶中,在37℃、5% CO2 培养箱培养2h,以除去贴壁细胞,收集未贴壁的细胞悬液即为脾淋巴细胞。
按照这个步骤来,但是在第3步骤:离心后所得为白色沉淀上方只有一层红色膜为最佳状态,没有出现一层红色膜,所以不知道收集到的是否为淋巴细胞。
求助怎么鉴别提取的细胞是否为淋巴细胞
虫子官方认证 发表于 2017-7-10 17:40   显示全部楼层
不纯

点评

请教下,该怎么提纯,然后怎么鉴别这些细胞就是淋巴细胞呢?  详情 回复 发表于 2017-7-12 10:20
 楼主| 1038415724 发表于 2017-7-12 10:16   显示全部楼层
C:\Users\DELL\Desktop
 楼主| 1038415724 发表于 2017-7-12 10:20   显示全部楼层

请教下,该怎么提纯,然后怎么鉴别这些细胞就是淋巴细胞呢?
窗边的小豆豆 发表于 2018-6-21 17:42   显示全部楼层
论坛有你更精彩!
清幽小妞 发表于 2018-6-21 17:42   显示全部楼层
楼主,这是您写的吗?
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