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CELL RES :万建民院士丨钙离子启动免疫系统的分子机制(附NMT实验体系)

 楼主| xuyue_2017 发表于 2019-8-27 13:26  
查看: 117204|回复: 0|显示全部楼层 |阅读模式

期刊:cell research
主题:钙离子启动免疫系统的分子机制
标题:A cyclic nucleotide-gated channel mediates cytoplasmic calcium elevation and disease resistance in rice
影响因子:17.848
检测指标:Ca2+流速
检测部位:水稻叶肉细胞
Ca2+流速流实验处理方法:
水稻幼苗,10uM chitin或10uM flg22肽瞬时胁迫
Ca2+流速流实验测试液成份:
0.2mM CaCl2, 0.1mM NaCl, 0.1mM MgCl2 and 0.1mM KCl,pH 5.2
作者:中国农科院万建民、王家昌

英文摘要
The transient elevation of cytoplasmic calcium is  essential for pathogen-associated molecular pattern (PAMP)-triggered  immunity (PTI). However, the calcium channels responsible for this  process have remained unknown.

Here, we show that rice CDS1 (CELL  DEATH and SUSCEPTIBLE to BLAST 1) encoding OsCNGC9, a cyclic  nucleotide-gated channel protein, positively regulates the resistance to  rice blast disease. We show that OsCNGC9 mediates PAMP-induced Ca2+  influx and that this event is critical for PAMPs-triggered ROS burst and  induction of PTI-related defense gene expression. We further show that a  PTI-related receptor-like cytoplasmic kinase OsRLCK185 physically  interacts with and phosphorylates OsCNGC9 to activate its channel  activity.

Our results suggest a signaling cascade linking pattern  recognition to calcium channel activation, which is required for  initiation of PTI and disease resistance in rice.

中文摘要(谷歌机翻)
细胞质钙的瞬时升高对病原体相关分子模式(PAMP)- 触发免疫(PTI)至关重要。然而,负责该过程的钙通道仍然未知。

在这里,我们显示编码OsCNGC9(环核苷酸门控通道蛋白)的水稻CDS1(CELL  DEATH和SUSCEPTIBLE to BLAST  1)正向调节对稻瘟病的抗性。我们显示OsCNGC9介导PAMP诱导的Ca2+内流,并且该事件对于PAMPs触发的ROS爆发和诱导PTI相关的防御基因表达是至关重要的。我们进一步显示PTI相关受体样细胞质激酶OsRLCK185与OsCNGC9物理相互作用并使其磷酸化以激活其通道活性。

我们的研究结果表明信号级联将模式识别与钙通道激活联系起来,这是启动水稻PTI和抗病性所必需的。

结果表明:响应于几丁质或flg22刺激,WT叶肉细胞比cds1叶肉细胞表现出强烈且快速的Ca2+流入(图3a,b和补充信息,图S6)。这些结果表明OsCNGC9可以介导水稻PTI中的Ca2+流入,并且这种能力在cds1突变体中受损。
结果表明:响应几丁质刺激,Nipponbare叶肉细胞比Osrlck185/  55双突变体叶肉细胞,表现出快速的Ca2+内流(图e)。此外,在几丁质处理Oscerk1敲除突变体后未观察到显着的Ca2+流入(图f)。这些结果共同表明OsRLCK185及其紧密同源物OsRLCK55参与水稻抗稻瘟病和PAMP诱导的Ca2+内流的调节。
​结果表明:在PAMPs刺激后,与Kitaake植物相比,OsCNGC9-OE转基因植物的叶肉细胞显示出更强的Ca2+流入。结合其他实验表明,OsCNGC9是水稻PTI的限速正调控因子。


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